| RAPD技术 | |
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生物探索者 等级 ★ 0 楼 发表于 2016/8/15 9:42:32 编 辑 |
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RAPD技术 一．RAPD技术简介 运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(Random amplified polymorphic DNA，随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短，但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及快速、简便的特点，使这个技术已渗透于基因组研究的各个方面。 RAPD技术建立于PCR技术基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为10聚体)为引物，对所研究基因组DNA进行PCR扩增。聚丙烯酰胺或琼脂糖电泳分离，经EB染色或放射性自显影来检测扩增产物DNA片段的多态性，这些扩增产物DNA片段的多态性反映了基因组相应区域的DNA多态性。 二．RAPD技术流程： 三．客户提供： ★基因组DNA： ●至少15μL样品，浓度为50-100ng/μL； ●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带，没有降解； ●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化； ●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里； ●DNA溶解后，肉眼看不到杂色； ★植物材料：新鲜组织，叶片采用硅胶干燥后或干冰运输； ★动物材料：新鲜组织，无水乙醇封存低温运输； |
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